项目文章药学顶刊APSB | 南开大学白钢/侯媛媛团队揭示人参皂苷CK“活血化瘀”的机制

大鼠急性软组织损伤模型，从软组织损伤大鼠获得的血浆用于非靶向代谢组学分析。

急性软组织损伤的特点是局部微循环障碍，导致血流量受损，血液黏稠度增加。作者采用大鼠急性软组织损伤模型发现CK减轻组织水肿，改善组织损伤，减轻胶原纤维增生，出血和严重血瘀，改善全血黏度的升高，减少等红细胞/白血病等细胞类型数量。总之，CK可显著改善大鼠血液循环障碍，减轻软组织损伤引起的炎症损伤（图1）。

接着，作者采用非靶向血浆代谢组学分析体内受CK影响的代谢物和相关途径。KEGG显示CK主要作用于HIF-1α信号通路。特别是，CK处理导致α-酮戊二酸（2-OG）和维生素C（Vc）显著下调，而这两种代谢物被报道在调节HIF-1α的羟基化修饰中与PHD2有着错综复杂的联系。作者发现PHD2的靶向抑制促进HIF-1α激活并增加VEGF表达，此外，CK不影响PHD2蛋白的表达，但增加HIF-1α及其下游蛋白VEGF的表达。上述数据表明在软组织损伤的情况下，CK和HIF-1信号通路在抑制PHD2功能方面的潜在相关性（图2）。

接着，作者开展一系列深入机制挖掘，发现CK特异性直接靶向PHD2蛋白（一种脯氨酸羟化酶），破坏胶原蛋白与PHD2结合，抑制胶原蛋白中羟脯氨酸（HYP）含量增加，改变了胶原蛋白的稳定结构，进而破坏VWF（血小板表面的VWF因子是构成血小板粘附于胶原表面的主要机制，这一过程与PHD2介导的胶原羟基化密切相关）和胶原蛋白之间的结合来减少血小板粘附，改善大鼠血液循环（图3）。

为了进一步验证靶向PHD2在血小板血栓形成中的关键作用，作者开展体内实验，结果显示，CK可以减少血小板粘附，阻碍血小板血栓形成。使用了3种已被临床批准用于治疗慢性肾脏病患者的症状性贫血的PHD2抑制剂Dap、Rox和Vad同样发现靶向PHD2减少血小板粘附，阻碍血小板血栓形成。此外，PHD2抑制剂联合ASP（aspirin，抗血栓药物）与单独给药相比，显示出更好的抗血栓形成效果（图4）。

靶向抑制PHD2以减弱胶原蛋白羟基化并随后阻止VWF与胶原蛋白的结合，代表了一种很有前途的创新抗血小板策略，可有效预防病理血栓形成，同时改善血液循环障碍（图5）。