干货分享 | 多糖结合疫苗核磁分析
2025-03-10
中科新生命
16鉴别分析
1H NMR技术是多糖组分和重复单位结构检定的强大工具，在分析过程中无需对多糖进行降解或者衍生，能分析不同多糖结构之间的细微差异，前已经是《欧洲药典》和WHO 推荐的多糖质量控制方法。
选择1H NMR谱中端基质子区信号作为肺炎球菌荚膜多糖的“指纹”区，通过与已知结构文献数据比对，进行鉴别分析。
▲Overlay of the selected spectral region
(4.64 to 5.89 ppm) of the 24 polysaccharides
C多糖含量分析
肺炎球菌的C多糖（C-polysaccharide， C-Ps）是肺炎球菌细胞壁组成成分，由核糖醇磷酸二酯键与荚膜多糖及细胞壁肽聚糖相连。C-Ps 由重复的五糖单元组成，其分子结构和大小与肺炎球菌荚膜多糖类似，在肺炎球菌荚膜多糖的生产纯化过程中很难将C-Ps 完全去除。C-Ps在肺炎球菌荚膜多糖疫苗生产中被视为杂质项，世界卫生组织（WHO）目前也将C-Ps 列为肺炎球菌荚膜多糖疫苗的杂质。因此，C-Ps杂质的定性和定量检测在肺炎球菌荚膜多糖疫苗研发和生产过程中具有重要意义。
采用1H NMR技术，可对多种肺炎球菌荚膜多糖进行C-Ps 杂质的绝对定量检测，通过对方法的线性、准确性和重现性等进行评估和验证，为肺炎球菌荚膜多糖疫苗的质量控制提供了一种快捷且准确的新方法。
▲C-Ps 含量测定的标准曲线
基于NMR法多糖结合疫苗检测项目列表
精制多糖鉴别
结构全解析
CPS含量
磷含量
C-多糖含量
O-乙酰化含量
参考资料：
【1】多糖结合疫苗质量控制技术指导原则（征求意见稿）
【2】USP-NUCLEAR MAGNETIC RESONANCE SPECTROSCOPY IDENTITY TESTING OF BACTERIAL POLYSACCHARIDES USED IN VACCINE MANUFACTURE
【3】Chitrananda Abeygunawardana, Thomas C. Williams, James S. Sumner, et al. Development and validation of an NMR-based identity assay for bacterial polysaccharides[J]. Analytical Biochemistry，2000，279: 226-240．
【4】王玺，任克明，陈晓航，白贵杰，张新庄，张轶，沈荣. 核磁共振波谱法在肺炎球菌荚膜多糖检定中的应用[J]. 微生物学免疫学进展, 2013, 41(3)：18-23.
【5】王丽娟，马庆华，张秀，扶晖. 定量核磁共振氢谱法测定肺炎球菌荚膜多糖中C多糖杂质的含量[J]. 分析化学研究报告，2024,52(5)：735-742.
