蛋白质定性分析

蛋白质定性分析是指利用质谱法进行蛋白质鉴定和序列分析。质谱技术具有较好的灵敏度、分辨率、准确度,随着质谱技术的不断发展和成熟,利用质谱法进行蛋白质定性分析愈来愈广泛。


蛋白质定性分析分为两种策略:

(1) top-down分析策略:完整的全长蛋白质经过离子化后进入质量分析器,通过测定蛋白质离子质量和串联质谱分析鉴定蛋白质序列。

(2) bottom-up分析策略:存在于溶液或者凝胶电泳条带中的蛋白质经过蛋白酶(如胰蛋白酶)酶解消化成较小肽段片段,这些肽段再进入质量分析器。最后通过肽指纹图谱或者串联质谱法进行肽段鉴定,该方法是通过对肽段序列的鉴定推断蛋白质序列。


目前,bottom-up分析策略被更广泛的应用于蛋白质定性分析工作。

根据使用仪器可分为:MALDI-TOF/TOF

                                          LC-ESI-MS/MS

根据样本类型可分为:蛋白质全谱分析(即shotgun分析)

                                          蛋白质胶条/混合液分析

                                          蛋白质胶点分析



   
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